Biologia Celular - Aula Teórica 08 - Microscopia Eletrônica

A aula de Microscopia Eletrônica inicia-se com a apresentação de dois tipos de ME:

- Microscopia Eletrônica de Varredura

- Microscopia Eletrônica de Transmissão

Ambas possuem algumas características em comum, como:

- fixação pelo glutaraldeído
- pós-fixação pelo tetróxido de ósmio
- desidratação em série alcoólica ou acetona

Porém, há também diferenças entre elas, como:

M.E.T.

- material deverá ser incluído em resinas especiais

- microtomia - cortes ultrafinos

- contrastação com metais pesados

M.E.V.

- material deverá passar por secagem

- evaporação com ouro na superfície a ser analisada

- não necessita de contrastação

Microscopia Eletrônica de Transmissão

- fixação: estabilização de estruturas
ex.: glutaraldeído, paraformaldeído, ósmio...

- obtenção de cortes semifinos/finos

- pontes cruzadas: fixador - componentes estruturais

- fixação química

Microscopia Eletrônica de Varreduras

- ponto crítico: retirada total de água do sistema
> CO2: remoção total do etanol
> energia cinética = gás

- metalização
> adiciona-se metal na superfície da célula -> aumenta a condutividade da amostra
> utiliza-se ouro e paládio


Esquema Geral

MET

* filamento de tungstênio - cátodo/produção de elétrons

* placa perfurada - ânodo/forma o feixe de elétrons

* bobina 1 ou lente magnética - direciona o feixe

* bobina 2 ou "objetiva" - dá o limite de resolução

* bobina 3 - projeção de elétrons

* vácuo e refrigeração

MEV

* trajeto dos elétrons - igual ao MET

* elétrons secundários - coletor - amplificador - pontos

* imagem - na tela do monitor

Fim da aula sobre microscropia eletrônica.